Основа хромогенного агара для листерий (по Оттавиани-Агости), 500 гр

Производитель: AllianceBioExpertise, Франция

Артикул:DSHB3067

Состав:

Дополнительный реагенты

Добавка для обогащения листерий Ottaviani & Agosti (Арт. DSHB3072):

1 флакон, достаточное количество для 500 мл полной среды

Селективная добавка для листерий Ottaviani& Agosti(Арт. DSHB3071):

1 флакон, достаточное количество для 500 мл полной среды

Способ приготовления:

Суспендируйте 35 г суховой навески в 476 мл дистиллированной воды и доведите до кипения при постоянном перемешивании. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121ºC в течение 15 минут.

Охладите до 45-50ºC и добавьте 1 флакон добавки для обогащения листерий Ottaviani & Agosti (арт.

DSHB3072) и 1 флакон селективной добавки для листерий Ottaviani & Agosti (арт. DSHB3071).

Хорошо перемешайте и проведите розлив. Среда выглядит мутной после застывания.

Описание

В комплекте со всеми дополнениями агар Listeria O&A является селективной и дифференциальной средой для обнаружения видов Listeria и предполагаемой идентификации Listeria monocytogenes.

Селективность достигается за счет высокой концентрации хлорида лития и смеси антимикробных препаратов. Дифференциальная активность обусловлена ​​хромогенным субстратом для обнаружения β-глюкозидазы, фермента, который присутствует во всех видах Listeria.

Специфическая идентификация достигается с помощью L-α-фосфатидилинозитола, который действует как субстрат для фосфолипазы C, которая присутствует только в Listeria monocytogenes и некоторых штаммах Listeria ivanovii.

Сочетание обоих субстратов позволяет дифференцировать L. monocytogenes, которая образует колонии сине-зеленого цвета, но окруженные непрозрачной зоной, от других видов Listeria, которые растут с сине-зелеными колониями без какого-либо ореола. Эта дифференциация становится очевидной после инкубации чашек в течение 24±2 часов при 37ºC.

Иногда, особенно с сильно загрязненными образцами, возможно, что могут вырасти некоторые колонии белого цвета, которые не являются Listeria. В этом случае рекомендуется этап обогащения перед инокуляцией чашек.

Наблюдения: большинство Listeria ivanovii также образуют непрозрачный ореол вокруг колоний после 48 часов инкубации. Это предполагаемое доказательство должно быть подтверждено путем проведения биохимических или серологических идентификационных тестов (ферментация сахара Ramnosa /ксилоза, тесты на гемолиз, тест CAMP и т. д.) или любого теста, подтверждающего вид без колебаний.

Хранение

Только для лабораторного использования. Хранить плотно закрытым, вдали от яркого света, в сухом прохладном месте (от +4 ºC до 30 ºC)

Контроль качества:

Температура инкубации: 37 ± 1 °C

Время инкубации: 44±4 ч

Инокулят:Практический диапазон 100 ± 20 КОЕ. мин. 50 КОЕ (продуктивность)/ 10⁴-10⁶ КОЕ (селективность)/ ≥ 10³ КОЕ (специфичность), согласно ISO 11133:2014/Amd 1:2018 и Adm 2:2020 37 ± 1 °C 44±4 ч

Литература

1. Artault, S., j.L. Bind, Y. Delaval, N. Dureuil, N. Gallart (2000) AFNOR validation of the ALOA method for the detection of Listeria monocytogenes in foodstuffs. Coll. Soc. Fran. Microbiol. 19-20 Oct. Paris.

2. Bannerman, E.S. & J. Bille (1988) A new selective medium for isolating Listeria from heavily contaminated material. Appl.m Environm. Microbiol. 54:1:165-167.

3. Greenwood, M., C. Willis, P. Dosweell, G. Allen & K. Pathak (2005) Evaluation of chromogenic media for the detection of Listeria species in food.

4.  Hitchins, A.D. & K. Jinneman (1998) Listeria monocytogenes in FDA-BAM 8th edition Revision A. Updater January   2003. AOAC Intl. Gathersburg. MD. USA.

5. ISO 11133:2014/ Adm 1:2018/ Adm 2:2020/ Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.

6. ISO 11290-1:2017 Standard. Microbiology of the food chain. Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and for Listeria spp.- Part 1: Detection Method

7. ISO 11290-2:2017 Standard. Microbiology of the food chain. Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and for Listeria spp.- Part 2: Enumeration Method

8. Jantzen, M.M., J. Navas, M. de Paz, B. Rodriguez, W.P. da Silva & M. Nuñez (2006) Evaluation of ALOA platingmedium for its suitability to recover high pressure-injured Listeria monocytogenes from ground chicken meat. Letters Appl. Microbiol 43:313-317

9. Manafi, M. W. Kneifel & S. Bascomb (1991) Fluorogenic and chromogenic substrates used in bacterial diagnostics. Microbiol Rev. 55:3:335-348 Ottaviani, F., M. Ottaviani & M. Agosti (1997) Esperienza su un agar salettivo e differenziale per Listeria monocytogenes. Industrie Alimentari 36:1-3

10.Victor Lachica, R. (1990) Selective plating medium for quantitative recovery of food-borne Listeria monocytogenes. Appl. Environm. Microbiol. 56:1:167-169

11.Watkins, J. & K.P. Sleath (1981) Isolation and enumeration of Listeria monocytogenes from sewage, sewage sludge and river water. J. Appl. Bacteriol. 50:1-9